1、所有使用者了解生物安全柜的使用方法和局限性。特別需要明確的是，當出現溢出，破損或操作時，安全柜就不再保護操作者。

2、生物安全柜運行正常時才能使用。

3、生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀察擋板。

4、安全柜內應盡量少放置器材或標本，不能影響后部壓力排風系統的氣流循環。

5、安全柜內不能使用本生燈，允許使用微型電加熱器，但好使用*次性無菌接種環。

6、所有工作必須在工作臺面的中后部進行，并能夠通過玻璃觀察擋板看到。

7、盡量減少操作者身后的人員活動。

8、操作者不應反復移除和伸進手臂以免干擾氣流。

9、實驗記錄本、移液管以及其他物品不得阻擋空氣格柵，因為這將干擾氣體流動，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。